熒光原位雜交與免疫熒光的區(qū)別:
原位雜交是從分子水平檢測(cè),免疫熒光是從蛋白水平檢測(cè)。
免疫熒光是利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。
熒光原位雜交方法是一種物理圖譜繪制方法,使用熒光素標(biāo)記探針,以檢測(cè)探針和分裂中期的染色體或分裂間期的染色質(zhì)的雜交。
熒光原位雜交的原理:
FISH(fluorescence in situ hybridization)技術(shù)是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)。
它的基本原理是:如果被檢測(cè)的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補(bǔ)的,二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。
將核酸探針的某一種核苷酸標(biāo)記上報(bào)告分子如生物w素、地高x辛,可利用該報(bào)告分。
免疫熒光的原理:
免疫學(xué)的基本反應(yīng)是抗原-抗體反應(yīng)。
由于抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性,所以當(dāng)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時(shí),只要知道其中的一個(gè)因素,就可以查出另一個(gè)因素。
免疫熒光技術(shù)就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標(biāo)記在抗體(或抗原)上,與其相應(yīng)的抗原(或抗體)結(jié)合后,在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性熒光反應(yīng)。